第一百七十二章 研制新的疫苗(1/3)

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唐欣接受完采访之后，回到她的私人实验室，就觉得少了点什么，她仔细一观察，哦，原来是少了一块牌匾。

她想到陈岩说的新星这个名字还不错，就直接吩咐夏东海，“老夏，你去订做了一块“新星工坊”的牌子，拿回来就挂在大门旁边，接下来不要打扰我，我需要完成最后一篇论文。”

“是。”夏东海回到办公室拿了钱，出去找木工雕刻的地方雕牌匾。

唐欣回到她在实验楼的书房，坐下翻看钟院士上次给她的调查报告，她发现国内在去年，乙型脑炎的发病率高达30,000例，感染的全都是儿童。

近十年来，竟有四五十万的新生儿感染乙脑病毒，死亡率还很高。

全世界有近10亿人口生活在乙型脑炎流行区， 该地区每年新生儿就超过5,000万，被感染的风险很大。

在亜洲的病毒性脑炎中，乙型脑炎是最严重的疾病，每年至少引起500,000临床病例和1000,000例病死， 绝大多数发生于儿童中。

在最近十年中，乙型脑炎的数起暴发流行感染地区， 越来越向曾经是非流行的地区扩大。

同时伴随很高的病死率和严重的持久性神经系统后遗症。

乙型脑炎是由乙型脑炎病毒所致的中枢神经系统急性感染病。

常在夏秋季流行，以10岁以下儿童多见，症状轻重不一，轻者无明显症状，重者可出现高热、惊厥、昏迷，重症者病后常留有后遗症。

因而在亞洲很多国家和地区，乙型脑炎成为严重的公共健康问题。

唐欣也是在看了这个调查结果才选择研制预防乙脑病毒感染的疫苗。

据她从那些医学杂志中所了解的乙型脑炎传染途径中，蚊子是乙脑病毒的主要传播媒介，猪是主要中间宿主，人因被带毒的蚊虫叮咬而感染。

目前还没有治疗乙型脑炎疾病的特效药物，从环境方面控制其传播的效果不理想。乙型脑炎 疫苗的免疫接种是控制乙型脑炎疾病最为经济有效的措施。

这个实验她一个人来弄很有点耗时间。

她直接去找了学校生物医学实验室的那些学长学姐帮忙。

只是这些学长学姐也很忙，在实验室里也各有各的工作。

那就没办法了，唐欣只好自己来，论文很简单，只花了一个星期就搞定，谁让她看过的医学杂志太多，对乙脑疫苗大概实验流程有一定的了解。

只是缺乏详细数据支撑，唐欣已经准备好所有所需材料。

唐欣先是找钟院士帮忙拿到国家批准的乙型脑炎病毒。

经过对乙脑病毒的实验了解，病毒颗粒呈二十面体对称结构，直径45-50nm，病毒颗粒由核心、 包膜和刺突组成，属黄病毒的一种。

基因为正链单股rna，rna包被于多肽的衣壳c中，组成病毒颗粒的核心。

其包膜中有糖基化蛋白e和非糖基化蛋白prm/m。

经过无菌试验，鉴别试验，从乙型脑炎病毒中挑选出sa14株、sa14-14-2株、p3株或nakayama株，病毒滴定检定合格，这几种毒株才可作为生产毒种。

在制备过程中病毒培养所用的细胞，唐欣没用地鼠肾和脑，这两种制作出的疫苗对接种者都具有一定风险性。

她打算制备出人二倍体细胞来进行实验。

唐欣完成的关于研发乙脑疫苗的论文，钟院士已经看完了，对她的这个设想还是很感兴趣。特意来了新星实验室参观，还在她的实验室待了几天。

眼看着唐欣在以细胞培养液为dmem，加入4～ 10％的无外源因子感染的胎牛血清，浓度100～200u/ml的庆大霉素 ，调ph至70～80之间。

细胞用柯氏瓶培养在三十六摄氏度的温度之间，然后培养五天左右。

直到培养成致密的单层细胞后，以一比二的比例扩增，再继续培养三天左右，细胞长成致密的单层细胞。

这时，唐欣弃去细胞培养液，并用ph70～80的磷酸盐缓冲液淋洗细胞表面，洗掉残留的牛血清。

经过几次反复的实验，唐欣就得到实验所需的人二倍体细胞2bs、mrc-5、kmb-17、wi-38，准备用于病毒接种。

钟院士也有些心痒痒，边帮着她做一些不紧要的工作。

他帮着唐欣把把挑选好的人体二倍细胞培养瓶进行接种。

由于乙脑病毒在人二倍体细胞内的病毒繁殖滴度较低，因此唐欣必须将乙脑病毒逐渐在人二倍体细胞内驯化适应。

唐欣把乙脑病毒接种于已长满单层的人二倍体细胞内，放进三十三摄氏度左右的培养室内继续培养。

当细胞病变达到百分之六十左右时收获细胞上清液，就说明在人二倍体细胞内生长繁殖的乙脑病毒 液，在依次进行一代一代适应。

在这期间，唐欣在不停的做着各种提取检测，当检查到乙脑病毒液中的乙脑病毒滴度达到75lgpfu/ml以上时，就可以用于乙脑疫苗生产用的种子病毒。

忙完之后，等着时间就行。